5.4.2.1 Preparation of suspensions

5.4.2.1 Preparation of suspensions (inocula) for the test
Prepare serial dilutions in a suitable diluent (e.g. quarter-strength Ringer's solution, peptone salt solution) and use the most suitable dilution step for the desired number of organisms (cfu) in a specified volume.
The suitable dilution to use as a test inoculum should be determined from previous tests conducted under strictly standardized conditions for all steps.
Use the suspensions (inocula) within a specified time (e.g. up to 2 h at room temperature or within 24 h if stored at 5 °C ± 3 °C; longer storage periods may be acceptable if validatedllOlUTI).
Frozen inocula may be used if it can be shown that the microorganism can survive for the chosen period.
5.4.2.2 Volumes of inocula
Volumes of inocula used for quantitative performance testing shall reflect those used under test conditions for the relevant media.
For diluents and liquid media used for quantitative testing, the volume of the inoculum shall be in the same ratio as used in the relevant International Standard, usually 10 % of the medium under test.
5.4.2.3 Inoculum level
5.4.2.5.1 Inoculum level for productivity testing
5.4.2.5.1.1 Quantitative testing
For the quantitative enumeration test, a level of around 102 cfu is necessary to achieve sufficient precision (see Table 1). This may necessitate the use of more than one plate replicate.
A practicable range of 80 cfu to 120 cfu per plate with a minimum number of 50 cfu per plate should be used. For filters, the same number of cfu are needed using one or more filters. Table 1 shows the 95 % confidence intervals associated with colony counts.
For quantitative tests of diluents and liquid transport media, an inoculum level of 103 to 104 cfu is needed to achieve an inoculum of around 100 cfu in the volume spread on the plates.

Wyniki (polski) 1:

5.4.2.1 przygotowanie zawiesiny (materiał inokulacyjny) badaniaPrzygotowanie kolejnych rozcieńczeniach w odpowiedni rozcieńczalnik (roztwór Ringera np. kwartale siła, peptonu roztworu soli) i używać najbardziej odpowiedniego rozcieńczenia do żądanej liczby organizmów (cfu) w określonej objętości.Odpowiednim rozcieńczeniu do używania jako inokulum testu należy określić na podstawie poprzednich badań prowadzonych w ramach ściśle znormalizowane warunki dla wszystkich etapów.Za pomocą zawieszeń (materiał inokulacyjny) w określonym czasie (np. do 2 h w temperaturze pokojowej lub w ciągu 24 h jeśli przechowywane w temperaturze 5 ° C ± 3 ° C; dłuższe okresy przechowywania może być dopuszczalne jeśli validatedllOlUTI).Materiał inokulacyjny mrożone mogą być używane, jeśli można wykazać, że mikroorganizmy mogą przetrwać w wybranym okresie.5.4.2.2 wielkości materiał inokulacyjnyWielkości materiał inokulacyjny wykorzystywane do badania ilościowe wydajności powinny odzwierciedlać te używane w warunkach badania, do odpowiednich mediów.Rozcieńczalniki i ciekłe stosowane do badań ilościowych ilość inokulum zostaje w tej samej proporcji jak używane w odpowiednim międzynarodowym standardem, zazwyczaj 10% średniej badanego.5.4.2.3 inokulum poziom5.4.2.5.1 poziom inokulum do testowania wydajności5.4.2.5.1.1 badania ilościoweWyliczenie ilościowe badania, poziom około 102 cfu jest niezbędne do osiągnięcia wystarczającej dokładności (patrz tabela 1). To może wymagają stosowania więcej niż jednej płyty powtórzeniem.Stosuje się szereg wykonalne cfu 80 do 120 cfu na płytkę z minimalną ilością 50 cfu na płytkę. Dla filtrów, tej samej liczby cfu są potrzebne przy użyciu jednej lub więcej filtrów. Tabela 1 pokazuje 95% przedziału ufności związane z Kolonii liczy.Dla badania ilościowe transportu płynnych mediów oraz rozcieńczalniki inokulum poziomu 103 – 104 cfu jest potrzebne do osiągnięcia inokulum około 100 jtk wielkości rozprzestrzenił się na płytkach.

Wyniki (polski) 3:

5.4.2.1 Przygotowanie zawiesiny (wyhodowane) dla badanego
przygotowania seryjnych rozcieńczeń w odpowiednim rozcieńczalnikiem (np. kwartału mocny dzwonka, peptonu roztwór soli) i za najbardziej odpowiedniego rozcieńczenia dla żądanej liczby organizmów (cfu) w określonej objętości.
Po odpowiednim rozcieńczeniu do wykorzystania jako próbę zaszczepienia powinna być określana z poprzednich testów prowadzonych w ramach ściśle znormalizowane warunki dla wszystkich kroków.
stosować zawiesin (wyhodowane) w określonym czasie (np. 2 h w temperaturze pokojowej lub w ciągu 24 godzin, jeśli jest przechowywany w temperaturze 5 °C ± 3 °C; dłuższe okresy przechowywania może być dopuszczalne, jeśli validatedllOlUTI).
Zamrożone inokuli mogą być stosowane, jeżeli można wykazać, że mikroorganizm może przetrwać dla wybranego okresu.
5.4.2.2 tomów inokuli
tomy wyhodowane na ilościowe testowanie wydajności powinny odzwierciedlać te używane w warunkach testowych na odpowiednich mediach.
dla rozcieńczalniki i płynnych środków używanych do badań ilościowych,Ilość inokulum powinny być w takim samym stosunku jak użyte w odpowiednich norm międzynarodowych, zazwyczaj 10 % średniej mocy testu.
.1 poziom zaszczepienia
5.4.2.5.1 poziom zaszczepienia do testowania wydajności
5.4.2.5.1.1 Badanie ilościowe
do ilościowego spermatyd, test poziomu około 102 cfu jest niezbędne do osiągnięcia wystarczającej precyzji (patrz tabela 1).Może to wymagać użycia więcej niż jednej płytki replikacji.
A możliwym zakresie 80 cfu 120 cfu na tabliczce przy minimalnej liczbie 50 cfu na płytce powinny być wykorzystane. Do filtrów, takiej samej liczby cfu są potrzebne przy użyciu jednego lub więcej filtrów. Tabela 1 pokazuje 95% przedziały ufności powiązane z kolonii.
dla badania ilościowe z rozcieńczalnikiem i transport ciekłego nośnika,Inokulum poziom 103 do 104 jtk jest potrzebna do osiągnięcia inokulum około 100 jtk w objętości rozprowadzić na płytkach.